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針對上述問題，汪麗燕教授團隊構建 DSPE-PEG????-GA 修飾的 Au/Cu/ZIF-8 納米藥物 PEG@AuCZ@CC，通過“代謝重編程+多模式細胞死亡”協(xié)同策略破解 HCC 免疫耐受。① CHCA 阻斷乳酸外排，造成胞內(nèi)乳酸堆積并負反饋抑制糖酵解，降低腫瘤葡萄糖消耗，形成“高葡萄糖-低乳酸”TME，促使 M2-TAM 向 M1 復極化，恢復 CD8? T 細胞功能并 destabilize Treg。② 納米酶 Au 仿葡萄糖氧化酶（GOx）持續(xù)耗糖產(chǎn) H?O?，與 Cu2?誘導的銅死亡、CO 觸發(fā)的鐵死亡協(xié)同，高效釋放 ATP、CRT、HMGB1 等 DAMPs，強力激活 ICD，招募并擴增腫瘤內(nèi) CD4?/CD8? T 細胞及記憶 T 細胞。上述代謝-免疫雙重調(diào)控將“冷” HCC 轉為“熱”腫瘤，建立持久系統(tǒng)免疫監(jiān)視，顯著抑制腫瘤進展(圖1)。相關研究在2025年10月15日以“Bimetallic Nanozyme Amplifier for Synergistic Ferroptosis-Cuproptosis and Metabolic Reprogramming to Reshape Immunosuppressive Tumor Microenvironment”為題發(fā)表于《Advanced science》（DOI: 10.1002/advs.202512764）上。

圖1 PEG@AuCZ@CC的合成程序和設計與作用原理揭示了如何協(xié)同結合鐵死亡和杯死亡來增強免疫原性細胞死亡（ICD），同時改善腫瘤免疫抑制微環(huán)境，從而共同增強抗腫瘤免疫反應的整體圖譜

（1）PEG@AuCZ@CC NPs的合成與表征

研究人員采用水熱法合成ZIF-8（圖2A），其典型菱面十二面體表面光滑，粒徑約135 nm（圖2B、E）。隨后通過一鍋法共摻Cu2?并原位還原HAuCl?，在ZIF-8表面均勻沉積2–3 nm Au納米顆粒，得到AuCZ@CC；產(chǎn)物保持ZIF-8晶型，出現(xiàn)Cu、Au新信號，水合直徑增至242 nm（圖2C、F、K）。繼續(xù)負載CO/CHCA并以DSPE-PEG2000-GA包覆后，形成311 nm的PEG@AuCZ@CC，表面覆有半透明PEG-GA膜，電位由+4.66 mV降至–8.34 mV，F(xiàn)TIR出現(xiàn)PEG特征峰（2872、1114 cm?1），元素映射顯示Zn、Cu、Au共存且分布均勻，證實殼層完整（圖2D、G、H、I、J）。UV-vis在≈200 nm與≈300 nm處檢出CO與CHCA特征吸收，包覆后峰強度減弱；標準曲線測得載藥率CO 4.7 %、CHCA 6.6 %，包封率51 %與70 %（圖2O）。該納米粒在純水及10 % FBS-DMEM中72 h內(nèi)粒徑、PDI、電位幾乎不變，5天血清穩(wěn)定性良好（圖2M、N）。透析實驗顯示，pH 5.4下Zn2?/Cu2?快速釋放、結構崩解，pH 7.4下保持穩(wěn)定，具備酸觸發(fā)釋藥能力（圖2P、Q）。

（2）PEG@AuCZ@CC NPs的酶樣活性

研究人員首先通過XPS表征了PEG@AuCZ@CC中金屬元素的價態(tài)與比例（圖2R-U）。Zn 2p譜圖出現(xiàn)結合能差為23.1 eV的雙峰，確認Zn以Zn2?形式存在（圖1S）；Cu 2p譜中931.97/951.80 eV和933.36/953.50 eV信號分別對應Cu?/?與Cu2?，表明Cu的多價共存為后續(xù)耗竭谷胱甘肽（GSH）并觸發(fā)銅死亡奠定基礎（圖2T）；Au 4f?/?（83.60 eV）和4f?/?（87.27 eV）均指向零價Au，且Au 4f?/?相較標準值負移0.4 eV，提示Au納米顆粒已與ZIF-8表面發(fā)生電子相互作用，成功錨定（圖2U）。

隨后，研究人員系統(tǒng)評估了該材料的葡萄糖氧化酶（GOx）樣活性（圖2V-X）。在密閉體系中，PEG@AuCZ@CC在1 h內(nèi)消耗約40 %葡萄糖，溶解氧顯著下降，體系pH降低，并在560 nm處出現(xiàn)H?O?特征吸收峰，而ZIF-8與PEG@CZ@CC無此性能，證實Au?納米酶活性（圖2V、W、X）。GSH耗竭實驗進一步顯示，隨著PEG@AuCZ@CC濃度升高，412 nm處DTNB特征吸收逐漸減弱甚至消失，定量結果與紫外-可見光譜一致，直觀顏色變化亦驗證Cu2?/Cu?介導的GSH清除能力（圖2Y）。綜上，研究人員證實PEG@AuCZ@CC兼具GOx樣產(chǎn)H?O?與GSH耗竭雙重功能，為后續(xù)強化Fenton反應提供了先決條件（圖2Z）。

圖2 PEG@AuCZ@CC NPs 的物理化學性質(zhì)表征。A) PEG@AuCZ@CC 制備示意圖。B) ZIF-8、C) AuCZ@CC 和 D) PEG@AuCZ@CC 的代表性 SEM 圖像和 TEM 圖像。E) ZIF-8、F) AuCZ@CC 和 G) PEG@AuCZ@CC 的元素映射。H) 納米藥物的能量衍射光譜 (EDS)。I) ZIF-8、PEG-GA 和 PEG@AuCZ@CC NPs 的傅里葉變換紅外光譜。J) 納米藥物和 DSPE-PEG2000-GA 的 Zeta 電位。 （K）ZIF-8、AuCZ@CC 和 PEG@AuCZ@CC NPs 的 XRD 譜。L）通過動態(tài)光散射 (DLS) 測量 ZIF-8、AuCZ@CC 和 PEG@AuCZ@CC 在 PBS 中的水合粒徑。PEG@AuCZ@CC 在添加 10% FBS 的 DMEM 中培養(yǎng) 5 天后的 M) 穩(wěn)定性和 N) zeta 電位。O) AuCZ、AuCZ@CC 和 PEG@AuCZ@CC 的紫外可見吸收光譜。在不同時間和不同 pH 下，PEG@AuCZ@CC 對 P) CO 和 Q) CHCA 的累積釋放曲線。（R）PEG@AuCZ@CC NPs 的 XPS 全光譜和 S) Zn 2p、T) Cu 2p 和 U) Au 4f 的高分辨率 XPS 光譜。 V) PEG@AuCZ@CC NPs在葡萄糖溶液中葡萄糖消耗測試。W) 葡萄糖與ZIF-8、PEG@CZ@CC和PEG@AuCZ@CC共孵育過程中氧濃度隨時間變化的曲線。(X) 不同處理條件下的H₂O₂生成能力。Y) 不同濃度GSH和PEG@AuCZ@CC NPs存在下DTNB的紫外可見光譜。Z) 模擬酶的生物催化過程示意圖

圖3 PEG@AuCZ@CC NPs體外細胞攝取及抗腫瘤機制研究。A) Hepa1-6細胞與羅丹明B標記的PEG@AuCZ@CC NPs孵育不同時間后的CLSM圖像，其中細胞核用DAPI染色。B) 流式細胞術分析羅丹明B標記的PEG@AuCZ@CC NPs的細胞攝取效率。C) 不同處理24小時后對Hepa1-6細胞的細胞毒性測定。D) 不同處理后羥基自由基染色的Hepa1-6細胞的熒光倒置顯微鏡圖像，其中細胞核用DAPI染色。E) 不同處理后C11-BODIPY熒光探針染色的Hepa1-6細胞的熒光倒置顯微鏡圖像。F) 寡霉素或 2-脫氧-D-葡萄糖處理 Hepa1-6 細胞后代謝物變化示意圖。G) 不同處理后 Hepa1-6 細胞的 ATP 來源。H) Hepa1-6 細胞的主要代謝途徑從糖酵解轉向氧化磷酸化。I) 在用 Cu(II)-Elesclomol 處理的含有 PBS 或 2-DG 的培養(yǎng)基中生長的 Hepa1-6 細胞的活力。J) 在用 Cu(II)-Elesclomol 處理的含有高葡萄糖或半乳糖的培養(yǎng)基中生長的 Hepa1-6 細胞的活力。K) 不同處理后 Hepa1-6 細胞的 ATP 來源。L) 不同處理后 Hepa1-6 細胞的主要代謝途徑從糖酵解轉向氧化磷酸化。海馬實驗測量用 PEG@Au/Cu/ZIF-8@CHCA 重復處理的 Hepa1-6 細胞的 M) OCR 和 N) ECAR。O) 不同處理后 Hepa1-6 細胞中的葡萄糖含量。P) 在不同培養(yǎng)基中生長的 Hepa1-6 細胞的活力。Q) 代表性 CLSM 圖像和 R) 不同處理后 Hepa1-6 細胞中 DLAT (綠色) 表達的半定量分析。細胞線粒體與 MitoTraker (紅色) 共染色，細胞核與 Hoechst 33 342 (藍色) 共染色。S) PEG@AuCZ@CC NPs 誘導的細胞內(nèi)杯狀凋亡示意圖。T) 不同處理后 Hepa1-6 細胞中 TFR1、SLC40A1、LC3A/B、GPX4 和 FTH1 的蛋白質(zhì)印跡分析。U）不同處理后 Hepa1-6 細胞中 POLD1、ACO2、DLAT、LIAS 和 FDX1 的蛋白質(zhì)印跡分析

（4）PEG@AuCZ@CC體外抗腫瘤作用及其抑制增殖和遷移的潛在機制

研究人員首先通過 Calcein-AM/PI 雙染證實 PEG@AuCZ@CC 的腫瘤殺傷效能：視野中幾乎全部為紅色死亡信號，活細胞綠色熒光極少（圖 4A）。流式進一步定量，該組凋亡率顯著高于其余各組（圖 4B）。EdU 摻入實驗顯示，其紅色增殖熒光最弱，表明 DNA 合成被顯著抑制（圖 4C）；平板克隆結果亦顯示集落形成能力最低（圖 4D）。Transwell 遷移/侵襲及劃痕實驗共同表明，PEG@AuCZ@CC 可顯著削弱 Hepa1-6 的運動能力（圖 4E、F）。

為排除急性毒性干擾，研究人員將藥物濃度降至亞致死劑量，發(fā)現(xiàn)細胞雖保持貼壁，卻出現(xiàn)扁平、腫脹及核體積增大等形態(tài)改變，且 12–48 h 內(nèi)密度無增加，提示增殖停滯。Western blot 顯示 MMP2/9 下調(diào)，證實遷移力受抑（圖 4G）；流式檢測顯示細胞被阻滯于 G0/G1 期（圖 4I、K）。機制上，G1/S 轉換關鍵蛋白 p-RB、Cyclin E1、CDK4 表達降低，CDK2 升高，表明 checkpoint 被激活（圖 4H）。彗星電泳可見明顯 DNA 拖尾，而抗氧化劑 α-維生素 E 可顯著減輕損傷并逆轉 G0/G1 阻滯（圖 4J–N），說明氧化應激介導的 DNA 斷裂是周期停滯的主因。3D 腫瘤球模型進一步證實，PEG@AuCZ@CC 組球體數(shù)量與直徑下降最為顯著（圖 4O）。綜上，研究人員證明 PEG@AuCZ@CC 在低濃度即可通過氧化應激-DNA 損傷-G0/G1 阻滯途徑持續(xù)抑制肝癌細胞增殖與轉移，兼具直接細胞毒與細胞周期調(diào)控雙重抗腫瘤效應，為克服實體瘤內(nèi)藥物濃度異質(zhì)性提供了潛在解決方案。

圖4 PEG@AuCZ@CC體外抗腫瘤作用及其抑制增殖、遷移的機制研究。A) 碘化丙啶(PI)和鈣黃綠素AM染色后Hepa1-6細胞的熒光倒置顯微鏡圖像及半定量分析。B) 碘化丙啶(PI)和Annexin V-FITC檢測試劑盒染色后Hepa1-6細胞的流式細胞術分析。C) EDU染色后Hepa1-6細胞的熒光倒置顯微鏡圖像，其中細胞核用DAPI染色。D) 集落實驗評估不同處理后Hepa1-6細胞的增殖情況。E) Transwell遷移和侵襲光學圖像評估不同處理后Hepa1-6細胞的轉移能力。 F) 處理后 0、12 和 24 小時的傷口愈合實驗的明視野圖像。G) 不同處理后 Hepa1-6 細胞中 MMP2 和 MMP9 的蛋白質(zhì)印跡分析。H) 不同處理后 Hepa1-6 細胞中 p-RB、Cyclin E1、CDK2 和 CDK4 的蛋白質(zhì)印跡分析。I,J) 不同處理后 Hepa1-6 細胞用碘化丙啶 (PI) 染色的定量數(shù)據(jù)和 (K, L) 流式細胞術模式。(M, N) 彗星試驗評估不同處理后 Hepa1-6 細胞的 DNA 損傷。O) 不同處理后 Hepa1-6 細胞的腫瘤球體實驗

（5）體外修飾免疫細胞功能

研究人員首先驗證 PEG@AuCZ@CC 誘導的免疫原性細胞死亡（ICD）。免疫熒光顯示，處理后 Hepa1-6 細胞膜 CRT 熒光最強，HMGB1 胞內(nèi)殘留弱，證實二者分別發(fā)生膜轉位與分泌（圖 5A-B；圖 S44）；Western blot 趨勢一致（圖 5C）。胞內(nèi) ATP 降至對照 36.33 %，培養(yǎng)基中升至 477.18 %，提示大量外排（圖 5D-E）。隨后獲取 C57 小鼠骨髓原代 DC，與處理后的腫瘤碎片共培養(yǎng) 24 h：鏡下見 DC 由圓形變?yōu)闃渫粻畛墒煨螒B(tài)，流式示 CD80?CD86? 成熟 DC 占 27.90 %，顯著高于各對照（圖 5G）；ELISA 測得 IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ 均顯著升高，表明 ICD 有效啟動 DC 成熟及促炎因子分泌。

在微環(huán)境層面，研究人員發(fā)現(xiàn) PEG@AuCZ@CC 阻斷 MCT1/2/4 后，培養(yǎng)基乳酸由 14.5 ± 0.3 mm 降至 9.2 ± 0.4 mm（圖 5H）。建立 RAW264.7-Hepa1-6 共培養(yǎng)體系，流式與 Western 一致顯示：該組 M2 標志 Arg-1、CD163/CD206 最低，M1 標志 iNOS、CD86 最高（圖 5J-L；圖 5K、M-O；）；ELISA 示 IL-6、TNF-α 升高，抑瘤因子 IL-10 下降（圖 5P-R），證實乳酸耗竭驅動 TAM 由 M2 向 M1 復極。

針對 Treg，研究人員先從 C57 脾分選 Treg，并在不同葡萄糖/乳酸濃度下培養(yǎng) 24 h。ELISA 顯示乳酸變化對 IL-10/TGF-β 分泌影響遠大于葡萄糖。將低乳酸條件培養(yǎng)的 Treg 與 CTLL-2 共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其對 CD4?/CD8? IFN-γ? 的抑制能力明顯減弱。繼而用 Transwell 將 Treg 與經(jīng)藥物預處理的 Hepa1-6 上清共培養(yǎng)：PEG@AuCZ@CC 組（G6）乳酸最低，IL-10/TGF-β 同步下降；CFSE 及流式顯示 CTLL-2 增殖與 IFN-γ 分泌顯著增強，表明乳酸減少直接削弱 Treg 抑制功能。綜上，研究人員證實 PEG@AuCZ@CC 通過“耗乳酸-增 ICD-復極 M1-抑 Treg”級聯(lián)，有效重塑免疫抑制微環(huán)境，為后續(xù)抗腫瘤免疫治療提供堅實基礎。

圖5 體外修飾免疫細胞功能。A) 不同處理后Hepa1-6細胞膜上CRT定位的CLSM圖像，其中細胞核用DAPI染色。B) 不同處理后Hepa1-6細胞核內(nèi)HMGB1定位的CLSM圖像，其中細胞核用DAPI染色。。C) 不同處理后Hepa1-6細胞中CRT和HMGB1的Western印跡分析。D) 不同處理下Hepa1-6細胞胞內(nèi)ATP水平；E) 胞外ATP水平。F) 未成熟樹突狀細胞(DC)與Hepa1-6細胞共培養(yǎng)體系示意圖。G) 不同處理組DC成熟情況的流式細胞術分析。(H) 不同處理后24小時Hepa1-6細胞培養(yǎng)基中乳酸水平的測定。 I) 體外實驗設計，探討乳酸對 RAW264.7 細胞功能的影響。J) 抗 CD86、抗 iNOS、抗 CD163 和抗 Arg-1 抗體處理后 Hepa1-6 細胞的 CLSM 圖像。K) 流式細胞術分析；M-O) 不同處理組 RAW264.7 細胞的定量數(shù)據(jù)。L) 不同處理后 RAW264.7 細胞中 CD163、Arg-1、CD86 和 iNOS 的蛋白質(zhì)印跡分析。不同處理組細胞因子的分泌水平，包括 P) IL-6、Q) TNF-α 和 R) IL-10

（6）體內(nèi)分布、生物安全性和體內(nèi)抗腫瘤作用

研究人員首先確認了PEG@AuCZ@CC 的靜脈安全性：與紅細胞 37^oC共孵 4 h，溶血率可忽略（≤1.2 %），RBC 形態(tài)完整。隨后以 Hepa1-6-LUC 皮下瘤模型評估體內(nèi)行為。Cy5.5 標記示蹤顯示，尾靜脈注射 0.5 h 后腫瘤熒光逐漸增強，PEG@AuCZ@CC 組 24 h 信號強度顯著高于 AuCZ@CC 組（圖 6A）；離體分布證實腫瘤富集最高，肺、肝次之。延長觀察至 48 h，肺信號 36 h 已明顯衰減，48 h 消失，而腫瘤仍高亮，排除肺毛細血管滯留造成的假陽性。對肺上皮（MLE-12）與血管平滑肌（MOVAS）細胞毒性試驗顯示，120 μg mL?1 作用 48 h 存活率 >75 %，提示肺蓄積無明顯毒性。治療實驗設 6 組（Control、CO、CO+CHCA、CZ@CC、AuCZ@CC、PEG@AuCZ@CC），第 1、4、7 天尾靜脈給藥，共 3 次（圖 6C）。給藥期間小鼠體重波動 <5 %（圖 6I）。21 天處死可見，PEG@AuCZ@CC 組腫瘤體積最小，抑瘤率達 85 %（圖 6D-H），且顯著延長生存期。H&E 與 TUNEL 顯示該組出現(xiàn)大面積核碎裂、溶解及陽性凋亡信號；Ki67 熒光最弱，提示增殖被顯著抑制。機制層面，免疫熒光與 Western blot 同步證實：瘤內(nèi) PTGS2 上調(diào)、GPX4 下調(diào)，DLAT 聚集成斑，表明鐵死亡與銅死亡共同執(zhí)行殺傷（圖 6J）。伴隨 ICD 標志，CRT 膜曝光增強，HMGB1 由核轉胞外（圖 6K）；引流淋巴結 DC 成熟率（CD80?CD86?）升至 28.7 %，顯著高于對照。綜上，研究人員闡明 PEG@AuCZ@CC 經(jīng)靜脈給藥可安全富集于腫瘤，通過同步觸發(fā)鐵死亡/銅死亡-ICD-DC 成熟軸，實現(xiàn)高效體內(nèi)抗腫瘤效應。

圖6 PEG@AuCZ@CC NPs的體內(nèi)抗腫瘤評價。A) 注射Cy5.5標記的AuCZ@CC NPs和Cy5.5標記的PEG@AuCZ@CC NPs后，Hepa1-6荷瘤小鼠體內(nèi)隨時間變化的熒光圖像。B) 注射后24小時采集的腫瘤和正常器官的離體熒光圖像。C) 體內(nèi)抗腫瘤流程示意圖。D) G1-G6組中第0天、第4天、第8天和第14天接受不同治療的Hepa1-6荷瘤小鼠的照片。E) 不同治療后腫瘤的數(shù)碼照片。F) G1-G6組中第14天采集的腫瘤重量。(G) 各組腫瘤生長指數(shù)(TGI) 。H) G1-G6組中接受相應治療的各組腫瘤體積隨時間的變化。I) G1-G6組中小鼠體重隨時間的變化。 (J) 第14天G1-G6期腫瘤切片的H&E、Ki67免疫熒光圖像、PTGS2免疫熒光圖像、GPX4免疫熒光圖像和DLAT免疫熒光圖像。K) 不同處理后腫瘤組織中CRT和HMGB1的免疫熒光圖像。L) 研究腫瘤中的代謝重編程及其對腫瘤微環(huán)境的影響。M) 不同處理組間氧化磷酸化和糖酵解相關中間代謝物表達的變化。（N）不同處理后血清、血漿和腫瘤間質(zhì)液中的葡萄糖和乳酸水平

（7）體內(nèi)抗腫瘤免疫治療

研究人員在體內(nèi)驗證 PEG@AuCZ@CC 的代謝重編程與免疫微環(huán)境重塑效應（圖 6L）。腫瘤組織代謝組顯示，該組氧化磷酸化中間產(chǎn)物上調(diào)、糖酵解中間產(chǎn)物下調(diào)，證實能量代謝向 OXPHOS 轉移（圖 6M）。同步采集血清、血漿及瘤內(nèi)液（TIF）發(fā)現(xiàn)，TIF 中乳酸由 14.5 ± 0.3 mm 降至 9.2 ± 0.4 mm，葡萄糖升高；外周血變化不明顯，說明重編程主要發(fā)生于瘤內(nèi)（圖 6N）。

代謝改善帶來免疫抑制細胞銳減：流式示 Treg 占比由 41.0 % 降至 13.2 %，MDSC 由 47.0 % 降至 18.0 %（圖 7A-B）。IHC 與流式共同表明 M2 標志 CD163/Arg-1 下調(diào)、M1 標志 iNOS/CD86 上調(diào)，M1/M2 比值顯著升高（圖 7C-D）。伴隨 ICD 與 mDC 激活，瘤內(nèi) CD4? 與 CD8? T 細胞浸潤增加，且 IFN-γ? 比例升高（圖 7E-G）；脾臟效應記憶 T（CD8?CD44?CD62L?）提高 2.9 倍（圖 7H）。瘤內(nèi)促炎因子 IL-1α、IL-12p70、IL-6、TNF-α、IFN-γ 升高，抑炎 IL-10、TGF-β 下降（圖 7I-O）。為排除炎癥反應源于全身毒性，研究人員建立 LPS 急性（5/10 mg kg?1）與亞急性/慢性模型（0.3 mg kg?1 連續(xù)注射 + 棉球肉芽腫）。PEG@AuCZ@CC 組小鼠體重、行為評分穩(wěn)定，血清 IL-6、TNF-α、IL-1β 峰值遠低于炎癥對照；外周血 NLR、SII、SIRI 及 ALT/AST 與 PBS 組無差異，證實無系統(tǒng)炎癥。長期安全評價延伸至 30 天：H&E 顯示心、肝、脾、肺、腎無組織學損傷；血常規(guī)、肝腎功能、心肌酶譜均在正常范圍；ICP-MS 未檢出上述器官 Zn、Cu 沉積。氧化應激指標（4-HNE、8-OHdG、SOD、CAT、GSH-Px、MDA）亦無異常，表明高代謝器官未受氧化損傷。綜上，研究人員證實 PEG@AuCZ@CC 通過瘤內(nèi)“耗乳酸-促 OXPHOS”代謝重編程，協(xié)同誘導 ferroptosis/cuproptosis-ICD，高效逆轉免疫抑制微環(huán)境，激活 T 細胞應答并建立記憶，且無全身毒性，具備良好的臨床轉化前景。

圖7 體內(nèi)抗腫瘤免疫治療。A) 流式細胞術分析接受不同治療的小鼠腫瘤中的Treg細胞。B) 流式細胞術分析腫瘤MDSCs。流式細胞術分析接受不同治療的小鼠Hepa1-6腫瘤中的C) M2 TAMs和D) M1 TAMs。E) 流式細胞術分析接受不同治療的Hepa1-6腫瘤中的CD4 + T細胞和CD8 + T細胞。流式細胞術分析接受不同治療的Hepa1-6腫瘤中的F) CD4 + CD69 + T細胞和G) CD8 + CD69 + T細胞。H) 流式細胞術分析接受不同治療的小鼠脾臟中的效應記憶T細胞。I–O) 不同治療后小鼠血清中不同細胞因子分泌水平