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IF:27.4 《AM》華農(nóng)劉珍珍:一種整體形成的janus水凝膠用于堅(jiān)固的濕組織粘合和抗術(shù)后粘連
專欄:學(xué)術(shù)前沿
發(fā)布日期:2025-02-06
作者:創(chuàng)賽科研

在探討傳統(tǒng)手術(shù)縫合方法的局限性時(shí),研究者們指出了其在臨床應(yīng)用中存在的一系列問題,包括手術(shù)過程中可能出現(xiàn)的二次出血、對正常組織的損傷、耗時(shí)以及穿孔組織泄漏的風(fēng)險(xiǎn)。

與皮膚傷口愈合相比,因體內(nèi)的環(huán)境極為復(fù)雜,開發(fā)用于修復(fù)內(nèi)部軟組織缺陷的有效水凝膠生物粘合劑面臨著更大的挑戰(zhàn)。特別是在腹部和胸部等動(dòng)態(tài)變化的體內(nèi)環(huán)境中,水凝膠需要同時(shí)具備對濕組織缺陷的強(qiáng)粘附性和對其他正常組織的抗粘附性,以避免術(shù)后粘連。

盡管已有研究致力于解決術(shù)后粘連或提高組織粘附強(qiáng)度,但這些水凝膠往往表現(xiàn)出無選擇性的雙面粘附,容易引起缺陷和正常組織之間的嚴(yán)重術(shù)后粘連。因此,開發(fā)具有粘附和抗粘附雙重性能的不對稱Janus水凝膠成為了一個(gè)有效的解決方案。


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針對上述問題,華南農(nóng)業(yè)大學(xué)劉珍珍教授開發(fā)了一種新型的具有粘附和抗粘附性能的不對稱janus水凝膠,通過控制水凝膠兩側(cè)自由羧基團(tuán)的界面分布來實(shí)現(xiàn)內(nèi)部軟組織缺陷修復(fù),同時(shí)解決術(shù)后粘連問題。該文章于2023年04月07日以《An Integrally Formed Janus Hydrogel for Robust Wet-Tissue Adhesive and Anti-Postoperative Adhesion》為題發(fā)表于《Advanced Materials》(DOI:10.1002/adma.202300394)。

(1)MAH水凝膠的設(shè)計(jì)與表征

圖1a展示了MAH Janus水凝膠生物粘合劑的制備流程圖,以及其在胃損傷修復(fù)中同時(shí)預(yù)防術(shù)后粘連的示意圖。光學(xué)顯微鏡圖像(圖1b)和3D輪廓圖像(圖1c)分別展示了MAH-600水凝膠的頂部和底部表面,揭示了在600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌速度下形成的不對稱表面結(jié)構(gòu),其中頂部表面觀察到較大的乳液滴,而底部表面則顯示出更密集的互連3D微結(jié)構(gòu)。相比之下,圖1d和1e中的MAH-3000水凝膠在3000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌速度下制備,顯示出較為均勻且光滑的表面結(jié)構(gòu),表明攪拌速度對水凝膠表面微觀結(jié)構(gòu)具有顯著影響。即通過調(diào)控?cái)嚢杷俣葋砭_控制水凝膠兩側(cè)自由-COOH基團(tuán)的分布,從而實(shí)現(xiàn)對濕潤組織的強(qiáng)大粘附和對其他正常組織的抗粘附性能。


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圖1 MAH水凝膠的設(shè)計(jì)與表征。(a)MAH Janus水凝膠制備示意圖及其在胃創(chuàng)面愈合同時(shí)防止術(shù)后粘連的應(yīng)用。(b)MAH-600和(d)MAH-3000上下表面光學(xué)顯微鏡圖。(c)MAH-600和(e)MAH-3000上下表面三維輪廓圖

(2)MAH水凝膠不對稱機(jī)制

圖2a和2b展示了MAH-600水凝膠的表面和截面的掃描電子顯微鏡(SEM)圖像,揭示了頂部表面的明顯多孔結(jié)構(gòu)和底部的密集互連3D微結(jié)構(gòu)。圖2c的能譜(EDS)元素映射圖像顯示了C和N元素在MAH-600頂部表面的分布,表明了CTAB在頂部表面的富集。相比之下,圖2d-2f展示了MAH-3000水凝膠的表面和截面的SEM圖像以及C和N元素的EDS元素映射圖像,顯示了在3000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌速度下制備的水凝膠具有均勻的3D微結(jié)構(gòu)和元素分布。圖2g為MAH水凝膠在600和3000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌速度下的不對稱結(jié)構(gòu)示意圖,說明了不同攪拌速度下形成的乳液滴大小差異,以及這些乳液滴如何作為物理交聯(lián)點(diǎn)影響水凝膠的不對稱性。即通過控制攪拌速度來調(diào)節(jié)水凝膠前體液中乳液滴的大小和分布,進(jìn)而精確控制水凝膠兩側(cè)自由-COOH基團(tuán)的界面分布,實(shí)現(xiàn)對濕潤組織的強(qiáng)粘附和對其他正常組織的抗粘附性能。


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圖2 MAH水凝膠不對稱機(jī)制的表征。(a)MAH-600表面和(b)截面形貌SEM。(c)MAH-600的C、N的元素映射圖。(d)MAH-3000的表面和(e)截面形貌SEM。(f)MAH-3000的C、N的元素映射圖。(g)MAH水凝膠在600和3000RPM時(shí)的不對稱結(jié)構(gòu)示意圖

(3)MAH水凝膠力學(xué)性能

圖3a顯示了不同攪拌速度下制備的MAH水凝膠的拉伸應(yīng)力-應(yīng)變曲線,表明MAH-3000水凝膠具有最高的拉伸強(qiáng)度,而MAH-600水凝膠由于其不對稱結(jié)構(gòu)和較低的交聯(lián)密度,展現(xiàn)出相對較低的機(jī)械性能。圖3b探討了不同表面活性劑對MAH水凝膠機(jī)械性能的影響,發(fā)現(xiàn)以CTAB為表面活性劑時(shí),水凝膠展現(xiàn)出最長的拉伸應(yīng)變。圖3c比較了MAH水凝膠與其他已報(bào)道的水凝膠生物粘合劑的機(jī)械韌性,證實(shí)了MAH-600水凝膠的優(yōu)越性。圖3d展示了MAH-600水凝膠的連續(xù)階梯拉伸應(yīng)力-應(yīng)變曲線,證明了其出色的自恢復(fù)能力。圖3e的循環(huán)拉伸測試進(jìn)一步證實(shí)了MAH-600水凝膠的卓越韌性和耐久性。圖3f至3i通過直觀的實(shí)驗(yàn)照片展示了MAH-600水凝膠的卓越機(jī)械性能,包括承受2kg重量、抵抗尖銳物體刺激、充氣至20倍體積以及被手術(shù)刀切割的能力。這些結(jié)果共同證明了MAH-600水凝膠在內(nèi)部生物粘合應(yīng)用中具有足夠的恢復(fù)力和耐受最大腹壓的能力,同時(shí)保持了良好的機(jī)械韌性和耐用性。


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圖3 MAH水凝膠力學(xué)性能表征。(a)以CTAB為表面活性劑的MAH水凝膠在600~3000RPM不同攪拌速度下的拉伸應(yīng)力-應(yīng)變曲線。(b)600RPM下不同表面活性劑的拉伸應(yīng)力-應(yīng)變曲線。(c)MAH水凝膠與生物粘合劑的機(jī)械韌性比較。(d)水凝膠的逐次拉應(yīng)力-應(yīng)變曲線。(e)不同應(yīng)變下MAH水凝膠的循環(huán)拉伸試驗(yàn)。(f)MAH-600水凝膠承重2公斤照片。對MAH-600水凝膠膜進(jìn)行尖銳刺激(g)或泵氣(h)。(i)MAH-600水凝膠被手術(shù)刀切割的圖片

(4)MAH-600水凝膠的不對稱粘附特性


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圖4 MAH-600水凝膠的不對稱粘附特性。(a)顯示上/下表面對濕豬皮粘附行為的照片。(b)MAH水凝膠剝離試驗(yàn)。(c)不同壓制時(shí)間下MAH-600水凝膠對豬皮的界面韌性。不同攪拌速度下水凝膠結(jié)合豬皮的剝離力曲線(d1)和界面韌性(d2)。不同表面活性劑對600RPM下豬皮剝離力曲線(e1)和界面韌性(e2)的影響。MAH-600水凝膠粘附不同濕組織的剝離力曲線(f1)和(f2)界面韌性


圖4a展示了MAH-600水凝膠頂部和底部表面對濕豬皮的粘附行為,其中底部表面顯示出比頂部表面更強(qiáng)的粘附性。圖4b說明了180°剝離測試的示意圖,用于定量評估MAH水凝膠對豬皮的粘附強(qiáng)度。圖4c展示了不同按壓時(shí)間對MAH-600水凝膠與豬皮粘附強(qiáng)度的影響,隨著按壓時(shí)間的增加,粘附強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)。圖4d和e分別展示了不同攪拌速度和不同表面活性劑對MAH水凝膠粘附性能的影響,其中MAH-600水凝膠在600 RPM攪拌速度和CTAB表面活性劑條件下,底部與頂部表面的粘附強(qiáng)度差異最為顯著。圖4f展示了MAH-600水凝膠底部表面對不同濕組織的粘附強(qiáng)度,包括胃、心臟和腸組織,顯示出良好的粘附性能。


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圖5 MAH-600水凝膠的水下粘附性能。(a)MAH-600水凝膠粘附豬皮在水下可以承受1公斤的重量。(b)水槍沖洗MAH-600粘接豬皮的粘接界面。(c)MAH-600水凝膠破裂壓力測試。(d)不同按壓時(shí)間下MAH-600水凝膠與部分商用生物膠粘劑的破裂壓力比較


圖5a中MAH-600水凝膠粘附的豬皮能夠在水中承受1kg的重量,證明了其在水下具有出色的粘附強(qiáng)度。圖5b使用水槍沖洗MAH-600粘附的豬皮結(jié)合界面,結(jié)果顯示水凝膠的粘附界面能夠承受強(qiáng)烈的水流沖擊而不脫落,進(jìn)一步證實(shí)了其在濕潤環(huán)境下的穩(wěn)定性。圖5c自制設(shè)備用于測試MAH-600水凝膠通過泵入模擬胃液(SGF)來承受動(dòng)態(tài)壓力的能力,即爆破壓力測試。圖5d比較了不同按壓時(shí)間下MAH-600水凝膠的爆破壓力與一些商業(yè)生物粘合劑的性能,結(jié)果表明,即使在短時(shí)間的按壓(30秒)后,MAH-600的爆破壓力也達(dá)到了195 mmHg,超過了最大腹壓(150 mmHg),并且當(dāng)按壓時(shí)間超過20分鐘時(shí),爆破壓力增加到362 mmHg。


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圖6 MAH-600水凝膠的體內(nèi)外應(yīng)用。MAH-600水凝膠對漏氣豬肺葉(a)和漏液豬胃(b)的體外封閉。(c)MAH-600型水凝膠應(yīng)變傳感器在體內(nèi)監(jiān)測兔心臟跳動(dòng)的照片。(d)MAH-600應(yīng)變傳感器檢測到的兔心臟跳動(dòng)隨時(shí)間的歸一化電信號


圖6a展示了MAH-600水凝膠對豬肺葉損傷的密封效果,其中MAH-600成功阻止了空氣泄漏,證明了其在水下形成氣密密封的能力。圖6b展示了MAH-600水凝膠對充滿水的穿孔胃的密封效果,即使在持續(xù)水流輸入的情況下也能保持密封,顯示了其在流體密封方面的卓越性能。圖6c展示了MAH-600水凝膠作為應(yīng)變傳感器,直接粘附在活體兔子心臟的動(dòng)態(tài)和彎曲表面上,用于實(shí)時(shí)監(jiān)測心跳,這表明了其在生物醫(yī)學(xué)監(jiān)測設(shè)備中的潛在應(yīng)用。圖6d展示了通過MAH-600水凝膠傳感器監(jiān)測到的活體兔子心臟跳動(dòng)的歸一化電信號,其中監(jiān)測到的心率約為每分鐘210次,處于正常理論范圍內(nèi),進(jìn)一步證實(shí)了MAH-600水凝膠對濕組織的強(qiáng)粘附能力。這些結(jié)果共同證明了MAH-600水凝膠在內(nèi)部傷口修復(fù)和生物醫(yī)學(xué)監(jiān)測設(shè)備中的潛在應(yīng)用價(jià)值,展現(xiàn)了其在臨床應(yīng)用中的廣泛前景。

(5) 體內(nèi)胃損傷修復(fù)及術(shù)后抗黏連

圖7a展示了在新西蘭白兔模型中建立的胃損傷(直徑5mm)后,使用MAH-600水凝膠進(jìn)行治療的效果,與手術(shù)縫合相比,MAH-600水凝膠能夠快速、簡單地實(shí)現(xiàn)完全貼合的密封。圖7b顯示了手術(shù)縫合組在術(shù)后第7天和第14天觀察到的明顯的網(wǎng)膜粘連和白色肉芽組織,這是由于胃液或血液從傷口泄漏引起的炎癥反應(yīng)。相比之下,MAH-600水凝膠治療的胃損傷在第14天幾乎完全愈合,表面光滑且無粘連,顯示出優(yōu)異的促進(jìn)傷口愈合和抗術(shù)后粘連的性能。圖7c和7d分別展示了使用蘇木精-伊紅(H&E)和Masson染色評估MAH-600水凝膠和手術(shù)縫合組在術(shù)后第7天和第14天的修復(fù)效果,結(jié)果顯示MAH-600水凝膠治療的組織在早期展現(xiàn)出更好的膠原表達(dá),表明更高的傷口愈合效率,并且在第14天,MAH-600水凝膠治療的傷口周圍的炎癥細(xì)胞數(shù)量顯著減少。這些結(jié)果共同證明了MAH-600水凝膠作為一種生物粘合劑,在內(nèi)部傷口修復(fù)中具有顯著的優(yōu)勢,包括簡便的一步法制備、出色的不對稱粘附性能、高機(jī)械韌性以及促進(jìn)傷口愈合的能力。


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圖7 MAH-600水凝膠作為胃創(chuàng)面修復(fù)的組織粘連和術(shù)后抗粘連物理屏障。術(shù)后第7、14天建立家兔胃創(chuàng)面模型(直徑5 mm),觀察MAH-600(a)和手術(shù)縫合(b)治療組的創(chuàng)面愈合效果。HE和Masson染色評估MAH-600(c)和手術(shù)縫合(d)治療組第7天和第14天的修復(fù)效果


研究小結(jié):

本研究提出了一種創(chuàng)新的、整體形成的Janus水凝膠,旨在解決傳統(tǒng)手術(shù)縫合方法的局限性,并改善內(nèi)部軟組織損傷修復(fù)的臨床效果。該水凝膠通過精確控制界面分布的自由羧基團(tuán)(-COOH),實(shí)現(xiàn)了對濕組織的強(qiáng)粘附性和對其他正常組織的抗粘附性,這一不對稱粘附性能是通過調(diào)節(jié)水凝膠制備過程中的攪拌速度來實(shí)現(xiàn)的。

研究中,MAH-600水凝膠展現(xiàn)了其在模擬體內(nèi)環(huán)境中對濕組織的卓越粘附能力,同時(shí)在體內(nèi)兔子實(shí)驗(yàn)中驗(yàn)證了其在胃缺陷修復(fù)中的效果,不僅減少了術(shù)后粘連,還促進(jìn)了傷口愈合。

該研究通過創(chuàng)新的材料設(shè)計(jì)和制備方法,成功開發(fā)了一種具有不對稱粘附性能的Janus水凝膠,為內(nèi)部傷口修復(fù)和生物醫(yī)學(xué)監(jiān)測提供了新的材料選擇。未來的研究可以進(jìn)一步探索該水凝膠的生物降解性、長期生物相容性以及在不同臨床應(yīng)用中的效果,以期實(shí)現(xiàn)其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。此外,這種通過調(diào)控材料微觀結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)特定性能的方法,也為其他高性能生物材料的開發(fā)提供了新的思路。

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